cas:129179-83-5,Biotin-HPDP,生物素-二硫吡啶的概述
2025-11-17
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Biotin-HPDP(生物素-二硫吡啶)是一種巰基反應(yīng)性的生物素化試劑,以下是對(duì)其的詳細(xì)介紹:
一、基本信息
中文名稱(chēng):生物素-二硫吡啶
英文名稱(chēng):Biotin-HPDP
CAS號(hào):129179-83-5
分子式:C24H37N5O3S3
分子量:539.78
外觀:固體
純度:≥95%
溶解性:水不溶性,需溶于二甲基亞砜(DMSO)或二甲基甲酰胺(DMF)等有機(jī)溶劑后,再稀釋于水性緩沖液中使用。
結(jié)構(gòu)式:
二、化學(xué)結(jié)構(gòu)與特性
結(jié)構(gòu)組成:由雙環(huán)生物素環(huán)結(jié)構(gòu)、附著在生物素戊酸側(cè)鏈上的1,6-二氨基己烷,以及側(cè)鏈末端的巰基反應(yīng)性基團(tuán)(吡啶基二硫化物)共同組成。
反應(yīng)活性:末端的吡啶基二硫化物能夠與蛋白或其他分子上的游離巰基(-SH)反應(yīng),形成穩(wěn)定的二硫鍵,并釋放吡啶-2-硫酮。
可逆性:形成的二硫鍵可被還原劑(如二硫蘇糖醇,DTT)裂解,釋放原始未修飾的生物分子,適用于需要回收原始分子的實(shí)驗(yàn)。
長(zhǎng)側(cè)鏈優(yōu)勢(shì):長(zhǎng)側(cè)鏈設(shè)計(jì)使生物素標(biāo)記的分子能夠更好地與親和素(avidin)或鏈霉親和素(streptavidin)探針結(jié)合,提高檢測(cè)靈敏度。
三、操作注意事項(xiàng)
溶解與儲(chǔ)存:
需溶于DMSO或DMF等有機(jī)溶劑后,再稀釋于水性緩沖液中使用。避免頻繁解凍,建議分裝后-20℃以下冰凍保存。
溶解時(shí)可用37℃加熱試管并在超聲波水浴中震動(dòng)片刻,以促進(jìn)溶解。
反應(yīng)條件:
在pH 6.5至7.5的緩沖液(如PBS)中反應(yīng)效果較佳。避免使用含硫醇或二硫化物還原劑的緩沖液,以免干擾反應(yīng)。
反應(yīng)溫度通常為室溫或25℃,反應(yīng)時(shí)間根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整(如90分鐘至數(shù)小時(shí))。
未結(jié)合試劑的去除:
反應(yīng)后需通過(guò)透析、超濾或柱層析等方法去除未結(jié)合的Biotin-HPDP,避免干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
安全防護(hù):
操作時(shí)需佩戴手套和護(hù)目鏡,避免直接接觸皮膚或眼睛。廢棄物需按實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范處理。
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