生物素 - C5 - 馬來酰亞胺(Biotin-C5-Mal)是一種重要的化學(xué)試劑,在生物化學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)用廣泛。
化學(xué)結(jié)構(gòu):由生物素、C5 連接臂和馬來酰亞胺三部分組成。生物素是維生素 B7 衍生物,具有與親和素或鏈霉親和素高親和力結(jié)合的特性。C5 連接臂是由 5 個亞甲基組成的柔性鏈,可減少生物素與馬來酰亞胺基團(tuán)之間的相互干擾。馬來酰亞胺是含碳 - 碳雙鍵的官能團(tuán),能與含巰基的分子發(fā)生特異性邁克爾加成反應(yīng)。
結(jié)構(gòu)式:

基本信息:分子式為 C14H19N3O3S,分子量為 309.38。外觀為淺黃色或白色固體。
物理性質(zhì):溶于大部分有機(jī)溶劑,如 DMSO、DMF 等,在含少量助溶劑的水性緩沖液(pH 6.5-7.5)中部分溶解。
特點:具有高特異性,僅與游離巰基反應(yīng),減少非特異性結(jié)合;標(biāo)記產(chǎn)物的共價鍵穩(wěn)定,實驗條件下不易解離;C5 連接臂可降低空間位阻,提升標(biāo)記效率及后續(xù)親和結(jié)合效率;生物相容性好,對生物分子活性影響小。
儲存與操作注意事項:需避光、密封儲存于 - 20℃干燥環(huán)境,避免頻繁解凍。反應(yīng)需在 pH 6.5-7.5 的緩沖液中進(jìn)行,避免使用含巰基的緩沖液,溶解后應(yīng)立即使用,防止馬來酰亞胺基團(tuán)水解失效。
應(yīng)用領(lǐng)域:在蛋白質(zhì)標(biāo)記中,可通過與半胱氨酸殘基反應(yīng),將生物素引入目標(biāo)蛋白,便于后續(xù)分離、純化及檢測;在抗體修飾中,能標(biāo)記治療性抗體的游離巰基,保持抗體活性,助力抗體藥物偶聯(lián)物(ADC)研發(fā);還可用于細(xì)胞表面標(biāo)記與成像,實現(xiàn)細(xì)胞分選、成像及功能分析等。
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