851113-28-5,Biotin-XX Tyramide Reagent ,生物素-XX 酪酰胺試劑的性質(zhì)
2025-12-07
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生物素-XX 酪酰胺試劑(Biotin-XX Tyramide Reagent,CAS號:851113-28-5)是一種用于生物分子標(biāo)記和檢測的生化試劑。
一、基本性質(zhì)
分子結(jié)構(gòu):由酚基、酪酰胺核心和長鏈親水生物素(Biotin-XX)組成。長鏈結(jié)構(gòu)(XX)提供柔性空間,使生物素遠離反應(yīng)位點,降低空間位阻對鏈霉親和素結(jié)合的影響。
分子式與分子量:分子式為C??H??N?O?S,分子量約為589.8。
物理形態(tài):淡黃色至淡棕色固體或粉末。
溶解性:易溶于有機溶劑(如DMSO、DMF)及部分水溶性緩沖液,溶解度≥59 mg/mL(DMSO)。
穩(wěn)定性:干燥狀態(tài)下穩(wěn)定,需低溫(-20℃)避光保存;水溶液或含過氧化氫體系中酚基易氧化,需新鮮配制或避光操作。
pH適應(yīng)性:常用緩沖液范圍為pH 7–9,生物實驗條件下穩(wěn)定,不影響靶分子結(jié)構(gòu)。
結(jié)構(gòu)式:
二、核心功能
信號放大:在過氧化物酶(如HRP)催化下,酚基氧化生成酚氧自由基,與靶分子(如蛋白質(zhì)或核酸)上的酪氨酸殘基共價結(jié)合,實現(xiàn)局部高密度標(biāo)記。生物素基團可與鏈霉親和素-熒光素、鏈霉親和素-HRP等探針結(jié)合,實現(xiàn)多重信號放大和多模態(tài)檢測。
提高檢測靈敏度:通過HRP催化酪酰胺自由基生成,實現(xiàn)抗原位點的高密度標(biāo)記,結(jié)合鏈霉親和素-熒光素或酶探針,顯著提高低豐度蛋白檢測的靈敏度和準確性。
降低抗體濃度:在無需較高靈敏度的場景中,可降低抗體或探針濃度,減少非特異性結(jié)合和交叉反應(yīng)。
膜不可滲透性:長鏈親水結(jié)構(gòu)使其無法進入細胞,僅標(biāo)記細胞表面蛋白,避免胞內(nèi)蛋白干擾,適用于細胞表面受體研究。
三、應(yīng)用領(lǐng)域
免疫組織化學(xué)(IHC):用于檢測低豐度抗原,通過生物素-XX酪酰胺的級聯(lián)放大,提高檢測靈敏度。
熒光原位雜交(FISH):結(jié)合熒光標(biāo)記的鏈霉親和素,增強核酸信號,實現(xiàn)基因表達的定量和定位分析,尤其適用于熒光檢測中克服組織自發(fā)熒光背景干擾。
蛋白質(zhì)印跡(Western Blot):提高低表達蛋白的檢測靈敏度。
基因表達分析:標(biāo)記靶核酸分子,實現(xiàn)基因表達的定量和定位分析。
細胞成像實驗:通過標(biāo)記細胞內(nèi)的特定分子,使得研究人員能夠更直觀地觀察和研究細胞內(nèi)的生物學(xué)過程。
四、操作注意事項
存儲條件:建議存放于-20℃以下環(huán)境,保持冰凍、干燥,并避光保存。短期保存可置于4℃。
溶解與使用:本產(chǎn)品溶于部分有機溶劑,使用過程中務(wù)必保持產(chǎn)品干燥,避免陽光直射。避免頻繁解凍,建議現(xiàn)配現(xiàn)用,確保產(chǎn)品性能穩(wěn)定。
安全防護:操作時佩戴手套和防護眼鏡,避免長期吸入、皮膚接觸或攝入;在通風(fēng)良好環(huán)境中使用。
緩沖液選擇:使用pH 7–9的緩沖液,避免pH影響靶分子結(jié)構(gòu)或試劑穩(wěn)定性。
多重標(biāo)記:可與熒光標(biāo)記試劑、酶標(biāo)記試劑等聯(lián)合使用,實現(xiàn)多重標(biāo)記和檢測,需根據(jù)實驗需求優(yōu)化條件。
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